目录高中生物基因工程口诀 高中生物基因工程讲解 高中生物基因工程质粒 高中生物基因工程图片 高二生物基因工程笔记
孙小娟
基因工程和细胞工程是生物学的前沿，而历年高考题会基于高中生物课本知识，考察一些实际应用中涉及到的相关问题。这对学生和老师而言，都是一种挑战。经过多年的教学实践和思考，笔者有一点个人意见，在这里提出来与大家商榷。
1 2009年江苏高考34题
1.1原题目
苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图(为抗氨苄青霉素基因)，据图回答下列问题。
(2)图中②表示Hin dⅢ与 Bam HⅠ酶切、DNA连接酶连接的过程，此过程可获得种重组质粒；如果换用 Bst l与 Bam HⅠ酶切，目的基因与质粒连接后可获得种重组质粒。
1.2 原答案及解析
1.2.1 原答案
这道高考题原答案给的启派是2和1。
1.2.2 解析
如下图所示， Hin dⅢ与 Bam HⅠ酶切目的基因所在片段后，得到的两种片段都能与 Hin dⅢ与 Bam HⅠ酶切后的质粒重组，所以可得到两种重组质粒。
如下图所示，如果换用 Bst l与 Bam HⅠ与酶切得到的一种片段，与用 Bst l与 Bam HⅠ酶切后的质粒重组，可得到一种重组质粒。
1.3 疑问
做此类题目时，是否要考虑正反接？
由图可知， Bst l与 Bam HⅠ有相同的酶切序列，酶切后有相同的粘性末端，所以，如果考虑正反接，用 Bst l与 Bam HⅠ酶切质粒和目的基因所在片段后，再用DNA连接酶连接可得到两种重组质粒。
但是，显然原答案是没有考虑正反接的。
2 2012年江苏高考32题
1.1原题目
图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有 Msp Ⅰ、 Bam H Ⅰ、 Mb o Ⅰ、 Sma Ⅰ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题：
（4）若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加的培养基进行培养。经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，其最可能的原因是。
2.2 原答案及解析
2.2.1原答案
第一个空的答案是“ Bam H I”，第二个空的答案是“抗生素B”，第三个空给的答案是“同种限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因D与质粒反向连接”。
2.2.2 解析
因为目的基因和运载体是用同种限制酶切割的，目的基因两侧的末端和质粒切割后的两个末端都能进行互补配对，可能出现目的基因反向连接在运载体上的情况，导致基因D不能正确表达。
2.3 要考虑正反接
从这道题来看，显然做此类试题是要考虑正反接的。
3 一道常见的基因工程试题
3.1试题内容
粗局 如图是含某目的基因的DNA片段，据图回答下列问题：
3.2原答案
第一个空是“3”，第二个空是“2”，第三个空是“6”。
3.3 原解析
Eco RⅠ、 Sma Ⅰ限制酶识别的序列均为6个核苷酸。 Eco RⅠ能识别GAATTC序列，切割后的为黏性末端—GAATTC——CTTAAG—； Sma Ⅰ识别CCCGGG序列，切割后的为平口末端—CCCGGG——GGGCCC—。如下图，该DNA片段共有2个 Eco RⅠ的切点和1个 Sma Ⅰ的切点，共切出4个黏性末端和2个平口末端。
3.4 疑问
限制酶的酶切序列与脱氧核苷酸的方向是否有关？
我们知道组成DNA分子的两条脱氧核苷酸链反向平行，如果一条链从左向右是5ˊ→3ˊ，则另一条链从右到左就是5ˊ→3ˊ。那么，限制酶在识别酶切序列时不受脱氧核苷酸链方向的限制吗？
3.5 个人观岩旁让点
给出的DNA分子的碱基序列，一般都是上面一条链是5ˊ→3ˊ方向，下面一条链是3ˊ→5ˊ方向。虽然高中生物课本上没有在限制酶的酶切序列上标出方向，但实际上大家约定成俗，在写限制酶的识别序列时，是按从5ˊ→3ˊ的方向来写出的，限制酶的酶切序列是与脱氧核苷酸的方向相关的。
3.6 解析及本题正确答案
如下图，在该DNA片段上有1个 Eco RⅠ的切点和1个 Sma Ⅰ的切点，共切出2个黏性末端和2个平口末端。
所以本题的正确答案为：第一个空是“2”，第二个空是“2”，第三个空是“4”。
4 总结反思
基因工程近些年来发展得很快，基因工程部分的理论知识也在不断地完善。高考题可以说是我们平时练习的高质量的习题，尚且具有疑问，所以，作为老师我们要不断更新和完善知识体系，尊重科学事实，有探求真理的精神，自己首先要有正确的观点。
1 目的基因是你自己研究的那个基因,是你人为添加到质粒上的基因.
标记基因是质粒上原本就存在的基因,一般是抗性基因.
在克隆的时候,你怎么判定哪些质粒是转化成功进入细胞了的呢?也就是“组DNA的鉴定和选择”的过程.而标记基因就是标记出连接转化成功了的克隆.如果标记基因,比如抗性基因表达了,那么就会在抗性培养基上长出菌落来.这样也从侧面说明了,你的目的基因很可能也克隆成功了.
2 首先你要弄清楚质粒的定义,它同样是一碧闭中可以独立存在在细胞中独立复制的环状DNA,独立于细胞基因组DNA.一般基因工程中,构建成功的质粒导入到细胞中,不需要整合到体细胞基因组中,就可以完成复制或者表达目的基因的功能.
但是,也有特殊情况下,需要通过同源重组将目的基因整合到细胞基因组DNA中的,这种视实验需要而定.
3 整合,一般是通过同源重组的途径,将你的目的基因插入或者替换到体细胞基因组DNA中.这样就可以随着细胞的分裂完成复制,或者随着细胞悔稿裂某些基因的表达调控使得目的敬咐基因得到表达和调控.相当于就是使得你原本外来的目的基因称为体细胞的整体的一部分了.
基因工程是生物选修三课本的内容，也是高中生要掌握的重要知识点。下面我为大家整理高中生物选修三基因工程知识点，希望对大家有所帮助!
高中生物选修三基因工程知识点
一、基因工程的概念
基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。
二、基因工程的原理及技术原理：基因重组技术
基因工程的基本
1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)
(1)来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。
(2)功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。
(3)结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端.
2.“分子缝合针”——DNA连接酶
(1)两种DNA连接酶(E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶)的比较：
①.相同点：都缝合磷酸二酯键。
迟毁②.区别：E•coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。
(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。
3.“分子运输车”——载体
(1)载体具备的条件：
①能在受体细胞中复制并稳定保存。
②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。
③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。
(2)最常用的载体是质粒：
它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。
(3)其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒
基因工程的基本操作程序
第一步：目的基因的获取
1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。
2.原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。
3.PCR技术扩增目的基因
(1)原理：DNA双链复制
(2)过程：①加热至90～95℃DNA解链;
②冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链;
③加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成
第二步：基因表达载体的构建
1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。
2.组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因
(1)启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。
(2)终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段 ，位于基因的尾端。
(3)标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。
第三步：将目的基因导入受体细码枣备胞
1.转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内岩亩维持稳定和表达的过程。
2.常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是 农杆菌转化法，其次还有 基因枪法和 花粉管通道法等。
3.将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是 显微注射技术。此方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞：
4.重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是
标记基因是否表达.
第四步：目的基因的检测和表达
1.首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 DNA分子杂交技术.
2.其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用 用标记的目的基因作探针与mRNA
杂交。
3.最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取
蛋白质，用相应的抗体进行抗原-抗体杂交。
4.有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如 转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。
基因工程的应用:
1.植物基因工程：抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质。
2.动物基因工程：提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物。
3.基因治疗：把正常的外源基因导入病人体内，使该基因表达产物发挥作用。
蛋白质工程的概念：
蛋白质工程：
是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。(基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质)
(1)蛋白质工程崛起的缘由：基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质
(2)蛋白质工程的基本原理：它可以根据人的需求来设计蛋白质的结构，又称为第二代的基因工程。
(3)基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)以上是蛋白质工程特有的途径;以下按照基因工程的一般步骤进行。(注意：目的基因只能用人工合成的方法)
(4)设计中的困难：如何推测非编码区以及内含子的脱氧核苷酸序列
高中生物选修三知识要点
1.基因工程的诞生
(1)基因工程：按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外 DNA 重组和转基因等技术，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
(2)基因工程诞生的理论基础是在生物化学、分子生物学和微生物学科的基础上发展起来，技术支持有基因转移载体的发现、酶的发现，DNA 合成和测序仪技术的发明等。
2.基因工程的原理及技术
基因工程操作中用到了限制酶、DNA 连接酶、运载体
3. 基因工程的应用
(1)在农业生产上：主要用于提高农作物的抗逆能力(如：抗除草剂、抗虫、抗病、抗干旱和抗盐碱等)，以及改良农作物的品质和利用植物生产药物等方面。
(2)基因治疗不是对患病基因的修复，基因检测所用的 DNA 分子只有处理为单链才能与被检测的样品，按碱基配对原则进行杂交。
4. 蛋白质工程
蛋白质工程的本质是通过基因改造或基因合成，对先有蛋白质进行改造或制造新的蛋白质，所以被形象地称为第二代基因工程;基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质
高中生物选修三知识点
1. 植物的组织培养
(1)细胞工程：指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过细胞水平或者细胞器水平上的操作，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获取细胞产品的一门综合科学技术。在细胞器水平上改变细胞的遗传物质，属于细胞工程。
(2)细胞全能性：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能。
考点细化：
① 都具有该生物全部遗传信息，因此从理论上讲，生物体的每一个活细胞都应该具有全能性。
② 细胞在生物体内没有表现出全能性的原因是基因选择性表达。
③ 植物细胞的全能性得以实现的条件是离体，合适的营养和激素，无菌操作。
④ 在生物的所有的细胞中，受精卵细胞的全能性最高。
(3)植物组织培养：在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配置的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。
考点细化：
① 已分化的细胞经过诱导后，失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程叫脱分化。
② 再分化是愈伤组织继续进行培养，重新分化出根或芽等器官。
③ 愈伤组织细胞排列疏松而无规则，高度液泡化的呈不定型状态的薄壁细胞。
④ 植物组织培养时培养基的成分有矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素、有机添加物，与动物细胞培养相比需要蔗糖、植物激素，不需要动物血清。
⑤ 在植物组织培养脱分化过程中，需要植物激素
⑥ 植物组织培养全过程中都需要无菌，愈伤组织之前不需要光照
(4)植物组织培养技术的用途：微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产。
考点细化：
① 用植物体的茎尖、根尖来获得无病毒植物
②人工种子中人工胚乳相当于大豆种子的子叶，人工种子与正常种子相比发芽率高。
③ 转基因植物的培育需要植物组织培养
(5)将不同种植物的体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体叫做植物体细胞杂交。
考点细化：
① 用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁获得原生质体
② 物理方法：电刺激、振荡、离心;化学方法：聚乙二醇
③ 植物体细胞杂交完成的标志是新细胞壁的形成
④ 融合后的杂种细胞通过植物组织培养才能发育成完整的植物体
(6)植物体细胞杂交这一育种方法的最大优点是克服远缘杂交不亲和障碍
2.动物的细胞培养与体细胞克隆
(7)动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体、胚胎移植等
(8)动物细胞培养经过原代培养和传代培养
考点细化：
① 动物细胞培养液的成分有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等
② 动物细胞培养基液体，植物细胞培养基固体，培养的动物细胞通常取自胚胎、幼龄动物的组织器官
② 动物细胞培养时的气体环境是95%的空气+5%二氧化碳的混合气体，CO2 起到调节 PH值作用
③ 使用胰蛋白酶处理使动物组织分散成单个细胞
④ 动物组织处理使细胞分散后的初次培养称为原代培养
⑤ 贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。这样的培养过程通常被称为传代培养。
3.细胞融合与单克隆抗体
(9)动物细胞融合与植物原生质体融合的区别：操作步骤不同：植物原生质体融合需要先去除细胞壁，动物细胞无细胞壁;诱导方法不同：动物细胞融合可以用物理、化学和生物三种方法，植物原生质体融合只能用物理、化学方法;最终目的不同：植物原生质体融合最终是为了获得杂种植株，动物细胞融合最主要目的是获得单克隆抗体。
(10)单克隆抗体与血清抗体相比特异性强、灵敏度高并可大量制备
(11)熟悉单克隆抗体制备过程。
考点细化
① 生产杂交瘤细胞要用B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合
② 注射相应抗原后，从小鼠脾脏中提取出B 淋巴细胞
③ 杂交瘤细胞既能大量增殖，又能产生专一抗体。
④ 制备单克隆抗体过程中需要两次筛选
基因工程是当前科技发展最为迅速的领域之一,也是高一生物学习的重要知识点，下面是我给大家带来的高中生物必修二基因工程知识点归纳，希望对你有帮助。
高中生物必修二基因工程知识点
一、基因工程
1、概念：基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术。通俗得说，就是按照人们意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。
2、原理：基因重组
3、结果：定向地改造生物的遗传性状，获得人类所需要的品种。
二、基因工程的
1、基因的“剪刀”—限制性核酸内切酶(简称限制酶)
(1)特点：具有专一性和特异性，即识别特定核苷酸序列，切割特定切点。
(2)作用部位：磷酸二酯键
(3)例子：EcoRI限制酶能专一识别GAATTC序列，并在G和A之间将这段序列切开。
(4)切割结果：产生2个带有黏性末端的DNA片断。
(5)作用：基因工程中重要的切割，能将外来的DNA切断，对自己的DNA无损害。
【注】黏性末端即指被限制酶切割后露出的碱基能互补配对。
2、基因的“针线”——DNA连接酶
(1)作用：将互补配对的两个黏性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子。
(2)连接部位：磷酸二酯键
3、基因的运载体
(1)定义：能将外源基因送入细胞的就是运载体。
(2)种类：质粒、噬菌体和动植物病毒。
三、基因工程的操作步骤
1、提取目的基因
2、目的基因与运载体结合
3、将目的基因导入受体细胞
4、目的基因的检测和鉴定
四、基因工程的应用
1、基因工程与作物育种：转基因抗虫棉、耐贮存番茄、耐盐碱棉花、抗除草作物、转基因奶牛、超级绵羊等等
2、基因工程与药物研制：干扰素、白细胞介素、溶血栓剂、凝血因子、疫苗
3、基因工程与环境保护：超级细菌
五、转基因棚盯渣生物和转基因食品的安全性
两种观点是：
1、转基因生物和转基因食品不安全，要严格控制。
2、转基因生物和转基因食品是安全的，应该大范围推广。
高中生物学习方法
回归课本最重要
经过对一部分的同学做试卷分析，发现很多的人觉得生物的题出得很难，但实际上他们错的题更多的是最基础的内容，长时间没有回顾学过的内容，很多人已经忘了一些很基础的知识，有谁还能准确地说出性状、相对性状、显性性状、隐性性状、性状分离等概念?还有谁能记得有氧呼吸的三个步骤?或者伴性遗传病与常染色体遗传病的区别?如果不能的话，孩子们，回归课本吧!先将基础知识梳理清楚再说!
多想几个为什么
生物的考察的另一个重点就是通过现象看本质。那么这就要求我们在复习的过程中除了要理解透彻基础知识外，还要多想想为什么是这样。比如说为什么影响光合作用的因素是二氧化碳、水分、温度等，它们是怎么影响光合作用的。
错题整理，归类解决
自己分析或找有经验的老师帮助分析为什么会错，如果是基础知识的不扎实，那么拿起课本再好好看一遍，强化一下，下链悄次争取不要犯同类错误，如果是知识点间的联系不明了，那么就好好想想知识的内在联系。一个人只有不断的消灭自己的则逗薄弱之处，才会更快的进步。
调整好心态
基因工程
基因工程的概念
基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。
（一）基因工程的基本
1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）
（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。
（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。
（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。
2.“分子缝合针”——DNA连接酶
(1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较：
①相同点：都缝合磷酸二酯键。
②区别：E·coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。
(2)与DNA聚合酶作用的异同: DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。
3.“分子运输车”——载体
（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。
②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。
③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。
（2）最常用的载体是 质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。
（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动宽源源植物病毒
(二)基因工程的基本操作程序
第一步：目的基因的获取
1.目的基因是指： 编码蛋白质的结构基因 。
2.原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合成法_。
3.PCR技术扩增目的基因
（1）原理：DNA双链复制
（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。
第二步：基因表达载体的构建
1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。
2.组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因
（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。
（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段 ，位于基因的尾端。
（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。
第三步：将目的基因导入受体细胞_
1.转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
2.常用的转化方法：
将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是 农杆菌转化法，其次还有 基因枪法和 花粉管通道法等。
将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是 显微注射技术。此方法的受体细胞多是 受精卵。
将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是 繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少 ，最常用的原核细胞是 大肠杆菌 ，其转化方法是：先用 Ca2+处理细胞，使其成为感受态细胞 ，再将 重组表达载体DNA分子 溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。
3.重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基慎态因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。
第四步：目的基因的检测和表达
1.首先要检测 转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 DNA分子杂交技术。
2.其次还要检测 目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用 用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。
3.最后检测 目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取 蛋白质，用相应的 抗体进行抗原－抗体杂交。
4.有时还需进行 个体生物学水平的鉴定。如 转基裂掘因抗虫植物是否出现抗虫性状。
（三）基因工程的应用
1.植物基因工程：抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质。
2.动物基因工程：提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物。
3.基因治疗：把正常的外源基因导入病人体内，使该基因表达产物发挥作用。
（四）蛋白质工程的概念
蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）
转录翻译
